Пять литров красного. Что необходимо знать о крови, ее болезнях и лечении | страница 43
А вот для определения гемоглобина применяется уже не метод Сали с применением соляной кислоты, а трансформирующий реагент – смесь ацетонциангидрина, калия железосинеродистого и гидрокарбоната натрия. При реакции гемоглобина с ним образуется гемиглобинцианид, причем интенсивность окраски содержимого пробирки, измеряемая уже не на глазок, а спектрофотометрами или фотоэлектроколориметрами, пропорциональна количеству гемоглобина.
Для забора крови из вены в наши дни используются устройства, которые называются вакутайнеры (или вакутейнеры). Название Vacutainer является зарегистрированной торговой маркой фирмы Becton Dickinson and Company (США). Вакутайнер состоит из стерильной одноразовой иглы и пластиковой пробирки (непосредственно вакутайнера). Пробирки (опять же применяется цветовая маркировка) содержат внутри дозированный объем вакуума для разного объема проб крови, разделительный гель (разделяет сыворотку и сгусток после центрифугирования) и различные антикоагулянты (тогда пробирки силиконизируют, то есть наносят на них силиконовое покрытие для избежания контактной активации свертывания крови) или же, наоборот, активаторы свертывания. В таких пробирках удобно хранить длительное время и транспортировать образцы крови, что позволяет обеспечить централизацию лабораторных исследований.
Рис. 10. Получение крови из вены с помощью вакутайнера
В середине XX века на смену ручному анализу клеток крови пришел автоматический метод. Технику автоматизированного подсчета клеток разработали в 1947 году братья Джозеф и Уоллес Культеры. Созданная ими компания Coulter Corporation была приобретена в 1997 году фирмой Beckman Instruments, сменившей свое название на Beckman Coulter, на сегодняшний день она является одним из ведущих игроков на рынке клинической диагностики.
Принцип работы счетчика основан на кондуктометрическом (или апертурно-импедансном) методе. Каждая клетка крови, плавающая в емкости с раствором электролита, увлекаемая потоком, проходит через отверстие очень маленького диаметра (апертуру) в погруженной в емкость трубке, из которой жидкость отсасывается насосом. Внутри и снаружи трубки расположены два электрода, так что, когда при прохождении клетки через апертуру вытесняется определенный объем электролита, это приводит к возрастанию сопротивления (импеданса) и изменению тока, протекающего в электролите, пропорционально размеру клетки.
Если в апертуре одновременно находятся две или более клетки, это приведет к ошибке подсчета, поэтому проба крови разводится до такой концентрации, при которой в апертуре датчика всегда будет не больше одной клетки. Анализируя количество и амплитуду импульсов, можно определить число и объем частиц, прошедших через апертуру. А измерив количество жидкости, пропускаемой через апертуру, можно вычислить концентрацию частиц в пробе.
