4.3. Диагностика лихорадки Западного Нила
Диагностика лихорадки Западного Нила, как и диагностика других арбовирусных инфекций, по нашему мнению, должна строиться на традиционных подходах.
Во–первых, это клиническая диагностика (остролихорадочное заболевание с общеинтоксикационным синдромом с поражением ЦНС или без него).
Второй важной составляющей является эпидемиологическая диагностика (после выявления больных на данной территории, т. е. после выявления очага инфекции, каждый лихорадящий больной должен рассматриваться как потенциальный больной ЛЗН). В повседневной работе очень трудно выделить, что более важно в диагностике – клиническая или эпидемиологическая составляющая.
Конечно, для верификации диагнозе важна лабораторная диагностика. Сегодня широко применяются традиционные стандартные методы, направленные на деление вируса ЗН, обнаружение его антигенов или антител к нему. Материала для исследования служат объекты внешней среды (органы птиц, других носителей и суспензии переносчиков) и от человека – спинномозговая жидкость, сыворотка крови; из секционного материала – мозговые ткани, печень и селезёнка.
В настоящее время для поиска вируса наиболее эффективной является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Амплификация РНК позволяет в течение нескольких часов размножить нуклеотидную последовательность в количестве, превышающем исходное в 10>9 раз, то есть обнажить единичные вирусы Такая высокая чувствительность и специфичность метода незаменима в период вирусемии и для контроля санации от возбудителя.
Поиск антигенов и антител к вирусу ЗН проводится с применением твердофазно–иммуноферментного анализа (ТИФА), энный метод по сравнению с другими иммуносорбционными методами наиболее результативен и позволяет выявлять антигены и антитела, а, кроме того, дифференцированно определяет lg различных классов, в том числе IgG и IgM.
Для обнаружения специфических антител обычно используют следующие методы исследования:
■ реакцию нейтрализации (РН).
■ реакцию связывания комплемента (РСК).
■ реакцию торможения гемагглютинации (РТГА).
Известно, что реакция нейтрализации (РН) является наиболее специфической их всех используемых серологических методов. В связи с этим ее применяют в ячестве подтверждающего теста при идентификации изолятов вируса. Однако в этом тесте выявляют перекрестно реагирующие антитела. Следовательно, нейтрализация вируса типовой сывороткой без количественного сравнения с гомологической системой недостаточна для идентификации вируса. Эта реакция ставится обычно на новорожденных мышах в качестве защитного теста, а также в культуре клеток с использованием метода бляшек.
