Справочник грибника | страница 140
На сохранность мицелия влияют такие факторы, как вид зернового субстрата, величина сосудов, количество субстрата и проветривание. Установлено, что на высококлейковинном зерне сохранность мицелия самая плохая. У просяного мицелия сохранность выше, чем у пшеничного. При этом мицелий на стерильном субстрате Тилля может храниться в холодильнике в течение года и дольше при температуре 2–5 °C. Величина сосудов и количество зерен имеют второстепенное значение при условии одинакового соотношения между объемом сосудов и их наполнением. Одним из наиболее важных условий является проветривание мицелия. При недостаточном проветривании мицелий может повреждаться, поскольку при затрудненном обмене воздуха замедляется пронизывание субстрата гифами. Особое значение имеет проветривание сосудов с мицелием с момента взятия их из холодильника до инокуляции субстрата.
В последнее время для предотвращения вегетативного роста мицелия успешно используется жидкий азот. Исследована степень влияния длительности хранения маточной культуры в жидком азоте на продуктивность и качество последующей культуры. Определено действие защитного агента на жизнеспособность мицелия при длительном сроке хранения. Замена защитного агента диметилсульфоксида глицерином в период замораживания оказала более благоприятное влияние на сохранность мицелия. Перед закладкой на хранение мицелий выдерживают при температуре 5 °C в течение 1–7 суток. Затем в 1– или 2-миллиметровые стеклянные ампулы помещают по 6–8 зерен, обросших мицелием, и добавляют 0,5 мл суспензионной среды. Перед замораживанием помещенные в ампулы зерна с мицелием выдерживают при комнатной температуре в течение 1 часа. Замораживание проводится медленно, по технологии, обеспечивающей контроль за процессом охлаждения. Замороженные культуры хранят в рефрижераторе с жидким азотом при температуре —160–196 °C. Для восстановления замороженного мицелия ампулы держат в водяной бане при температуре +38 °C до тех пор, пока не исчезнут последние следы льда. Для этого потребуется немногим более 1 минуты. Рост мицелия всех штаммов грибов определяют до хранения и после него. Для проверки роста одно зерно с мицелием культуры помещали в чашку Петри в агаризованной среде. Жизнеспособность и силу роста оценивали по данным роста в чашках Петри и по результатам урожайности. Для определения урожайности были использованы 36 ампул после хранения их в рефрижераторе с жидким азотом. Содержимое каждой ампулы использовалось для инокуляции одной мицелиальной культуры. Для выгонки мицелия требуется 21 день. Применяемая методика позволила сравнить жизнеспособность и силу роста мицелия до хранения в рефрижераторах с жидким азотом и после него. Установлено, что рост мицелия, хранившегося в таких условиях в течение года, был почти таким же, как и до хранения.