Неудивительно, что, когда был открыт механизм выработки антител в организме, появилась идея использовать антителообразующие клетки (АОК) для производства антител к заданному детерминанту. Как мы уже знаем, клон АОК (потомство исходного В-лимфоцита, реагирующего на антиген) может продуцировать только один вид антител. К сожалению, вытащить АОК из организма и поместить в искусственную питательную среду нельзя – там они погибают. Зато клетки лимфоидной опухоли (миеломы) прекрасно живут и размножаются в пробирке.
В 1975 году Мильштейн и Келер получили гибрид нормальной АОК и опухолевой клетки: для этого они иммунизировали лабораторных мышей антигеном, а когда в их крови появлялись антитела, то из мышиной селезенки готовили раствор, содержащий АОК. Добавив туда клетки миеломы (той же линии мышей), они с помощью полиэтиленгликоля частично растворяли клеточные мембраны и добивались слияния АОК с клеткой миеломы в гибридную клетку – гибридому. Используя селективную питательную среду, избавлялись от оставшихся миеломных клеток, а потом рассеивали гибридомы по лункам иммунологического планшета так, чтобы в каждой лунке оказался лишь один клон. Затем путем тестирования с использованием антигена отбирался клон нужной специфичности и вводился мышам, у которых вырастала опухоль и накапливалась асцитическая жидкость в брюшной полости – источник моноклональных антител.
Понятно, что такой метод нельзя применить к людям для выработки антител. Во-первых, иммунизация людей в большинстве случаев невозможна по этическим соображениям. Во-вторых, источником человеческих АОК может служить лишь периферическая кровь, где их содержание достаточно мало. В-третьих, в случае человеческой гибридомы возникает проблема гистосовместимости клеток миеломы и АОК, тогда как у грызунов используются АОК и клетки миеломы, полученные от одной линии животных. В-четвертых, человеческие гибридомы невозможно нарабатывать в асцитических жидкостях.
Первый препарат, созданный при помощи гибридомной технологии, – Orthoclone OKT3 (муромонаб-CD3) – вышел на рынок в 1986 году и предназначался для снижения иммунного отторжения при трансплантации органов. Свое название он получил в результате сокращения его изначального длинного названия – MURine MONoclonal AntiBody targeting CD3, что переводится как «мышиное моноклональное антитело, распознающее CD3»[140]. Однако впоследствии у этого препарата выявилось множество побочных эффектов, вызванных ответом иммунной системы пациента на чужеродные мышиные белки, поступающие в организм человека вместе с препаратом
