6 мая 1527 г. Рим был взят приступом, во время которого погиб герцог Бурбонский; после его смерти не дисциплинированность немецких и испанских солдат еще более увеличилась. Ворвавшиеся в город войска разграбили его, не пощадив даже церквей. Папа, запершись в замке св. Ангела, почти месяц продолжал сопротивляться, но затем капитулировал. Солдаты, овладев замком, отобрали у папы и кардиналов все найденные при них драгоценности и разграбили жилые помещения замка.
Сообщения об этих событиях (правда, не очень полные) пришли в Испанию в середине июня и произвели там гнетущее впечатление. Хотя некоторые испанцы, побывавшие в Италии, и рассматривали разгром Рима как божественное возмездие за прошлые и настоящие прегрешения и как предупреждение о необходимости быстрого проведения церковной реформы, но испанское общественное мнение, глубоко проникнутое католицизмом, было подавлено происшедшими событиями. Карл, отчасти сам виновный в случившемся, поскольку именно он санкционировал поход герцога Бурбонского на Рим (хотя он и не мог предугадать всех последствий), поспешил выразить свое сожаление и, чтобы подчеркнуть свою «скорбь», приказал отменить подготовлявшиеся по случаю рождения сына Филиппа (21 марта 1527 г.) празднества. Но Карл не спешил вызволять папу из того ужасного положения, в котором тот находился в качестве пленника солдатни, продолжавшей свои бесчинства. В этом, как и в других случаях, Карл терял время во всякого рода проволочках и колебаниях.
Только 31 октября было заключено соглашение, по которому папе должны были вернуть свободу и временное право на управление его владениями, за что он обязался соблюдать строжайший нейтралитет и уплатить содержание императорским войскам. Но папа бежал раньше, чем ему была возвращена свобода. Все ожидали, что он решительно выступит против Карла, потому что еще несколько месяцев назад, 31 июля, Карл направил всем христианским государям заявление, в котором оплакивал случившееся в Риме и снимал с себя всякую ответственность.
Дезорганизация императорской армии, наступившая после взятия Рима, и опала, наложенная Карлом на преданного ему Лейву (которого Карл обвинил даже в обмане), доставили французам такие преимущества, что к концу 1527 г. они снова овладели почти всей Северной Италией и поддержанные многими итальянскими государями, двинулись на Неаполь. К счастью для Карла, успехам Франциска помешал целый ряд обстоятельств: Англия (где общественное мнение было настроено против политики Уолси) не. смогла оказать помощи своей союзнице; во французской армии, осаждавшей Неаполь, началась эпидемия чумы; наконец, французам изменил, поссорившись е Франциском, генуэзский адмирал Андреа Дориа. Папа вскоре отказался от борьбы и вернулся в Рим под покровительство императора.
