Когда среда готова, садоводу-оператору предстоит ответственнейшая работа: отделить под микроскопом слой (группу) меристематических клеток, гарантированно свободных от вирусов и способных к регенерации соответствующих тканей и целого микрорастения; провести их стерилизацию и посев на питательную среду.
Очень важно, чтобы растение, с которого берется эксплантат, в это время находилось в оптимальной фенофазе (это может быть момент завершения органического покоя, начала активного роста, т. е. когда меристематические клетки предрасположены к активному делению).
Вся работа выполняется в условиях исключительной стерильности инструмента, оборудования, воздушного пространства комнаты.
К сожалению, через несколько дней часто оказывается, что посев инфицирован сапрофитной микрофлорой и его приходится выбраковывать. Чтобы этого не происходило, предстоит разносторонний поиск стерилизующих агентов, методики посева.
Колбы с помещенными в них на среды эксплантатами переносят в светокомнаты со строго регулируемым режимом освещения и температуры воздуха. Скорость движения транспортера, на котором размещают колбы, рассчитана так, чтобы к моменту проведения следующей процедуры в колбе было готовое к ней микрорастение с корнями, стеблем, листьями, почками. Чтобы получить такие растения, эксплантаты приходится несколько раз пересаживать на новые питательные среды, меняя физиологически активные вещества и концентрации растворов солей и различных добавок.
Готовые микрорастения сейчас высаживают в горшочки или ящички с питательным автоклавированным (прогретым в автоклаве или другим путем) субстратом. Но, несмотря на различные меры предосторожности, в том числе на тщательную отмывку растений от искусственной среды, обработку их марганцовокислым калием, операторы часто терпят неудачу из-за поражения объекта грибной инфекцией.
Повысить процент успешных пересадок можно, используя (после обеззараживания) такие материалы, как перлит, вермикулит, возможно, керамзит в чистом виде и в смеси с песком. Очень большие возможности в этом отношении могут открыться у цеолита. Есть сведения, что на нем подавляется развитие многих вредных для культурных растений микроорганизмов. К тому же он обладает свойством как бы регуляции режима питания растений.
За пересаженными микрорастениями ухаживают, выращивают их до стандартных размеров и дальше используют обычным путем.
Но… Бесспорно, вы не раз лакомились конфетами — драже «Изюм в шоколаде»? Такие «конфетки» готовят и используют в овощеводстве, только изюмом служат семена, а шоколадом — специальный субстрат из питательной смеси. У такого посевного материала, попавшего в почву, оболочка размягчается, проросшее семя оказывается в зоне, обогащенной питательными веществами, и быстро трогается в рост.
